期刊简介
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首页>中国微侵袭神经外科杂志
- 杂志名称：中国微侵袭神经外科杂志
- 主管单位：广州军区联勤部卫生部
- 主办单位：广州军区广州总医院
- 国际刊号：1009-122X
- 国内刊号：44-1459/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
Cdc2基因敲低逆转录病毒载体设计与构建方法
程序曲；王金鹏；黄强；王爱东；董军；兰青
关键词：RNA干扰, 基因, CDC2蛋白激酶, 逆转录病毒载体, 基因沉默, 神经胶质瘤
摘要：目的设计和构建cdc2基因敲低的表达siRNA的逆转录病毒重组载体.方法利用在线软件siRNA Selection Program和siDirect设计干扰cdc2基因靶序列,合成回文DNA序列,退火后克隆至线性化pSUPER质粒载体,重组质粒载体扩增、抽提后行双酶切电泳鉴定和测序分析,再转染phoenix细胞,产生逆转录病毒,并利用NIH3T3细胞测定病毒滴度.结果pSUPER表达siRNA重组质粒载体经双酶切电泳鉴定和DNA测序分析,证实插入的60 bp序列与原序列一致,位置正确.pSUPER.retro-C1、pSUPER.retro-C2病毒滴度值分别为4.25×105CFU/m1和6.00×105CFU/ml.结论cdc2基因表达siRNA逆转录病毒重组载体构建成功,可为研究胶质瘤分子病因学提供有用工具.
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