期刊简介
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首页>中国微侵袭神经外科杂志
- 杂志名称：中国微侵袭神经外科杂志
- 主管单位：广州军区联勤部卫生部
- 主办单位：广州军区广州总医院
- 国际刊号：1009-122X
- 国内刊号：44-1459/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
慢病毒在大鼠胶质瘤细胞基因转导中的应用
林健；戴学军；王伟民；袁振华；王红梅；何新舟；刘茜；曹晖；蒋立新
关键词：慢病毒载体, 质粒, 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因, 大鼠, 神经胶质瘤, 9L细胞
摘要：目的 应用慢病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因转导大鼠9L胶质瘤细胞.方法 构建慢病毒表达质粒pLenti6/V5-TK并以PCR、酶切及测序等方法鉴定.利用ViraPowerTM慢病毒表达系统,将重组质粒与包装混合物(Packaging Mix)共同转染293T细胞生产假病毒颗粒,转染48 h后收集培养上清,用其感染大鼠9L胶质瘤细胞,以抗稻瘟菌素(BSD)筛选出9L-TK细胞.RT-PCR、Western blot方法检测TK基因在9L-TK细胞中的表达.用MTT方法测试更昔洛韦(GCV)对体外培养的9L-TK细胞杀伤效果.结果 构建的重组质粒pLenti6/V5-TK经PCR、酶切及测序鉴定正确;该质粒与包装质粒共转染293T细胞获取的慢病毒滴度达2.7×105转导单位(TU)/ml.经BDS筛选获得的9L-TK细胞RT-PCR及Western blot结果显示TK基因表达阳性,且GCV对该细胞作用敏感.结论 成功利用慢病毒实现了TK基因转导大鼠9L胶质瘤细胞.
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