期刊简介
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首页>中国微侵袭神经外科杂志

- 杂志名称:中国微侵袭神经外科杂志
- 主管单位:广州军区联勤部卫生部
- 主办单位:广州军区广州总医院
- 国际刊号:1009-122X
- 国内刊号:44-1459/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
白介素-18基因修饰人脑胶质瘤U87/hIL-18细胞的建立
戴学军;袁振华;林健;徐敏敏;赵刚;王建业;王伟民
关键词:神经胶质瘤, 白细胞介素18, 质粒, U87细胞
摘要:目的 构建人白介素18(hIL-18)基困真核表达载体质粒,建立hIL-18基因修饰并呈稳定表达的人脑胶质瘤U87/hIL-18细胞.方法 从人淋巴细胞cDNA文库钓取hIL-18基因后行PCR扩增,利用peDNA3.1(+)质粒为载体,构建hIL-18真核表达质粒pcDNA 3.1/hIL-18.将构建的重组质粒转染人胶质瘤细胞U87,采用G418筛选单克隆细胞株,ELISA检测培养上清中的hIL-18蛋白含量,提取细胞RNA,RT-PCR方法检测hIL-18基因在U87/hIL-18细胞中的表达.结果 所得hIL-18 cDNA序列与Gene Bank比对一致,构建的质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确.质粒转染U87细胞后.经加压筛选获得hIL-18基因稳定、高效表达的U87/hIL-18单克隆细胞株,细胞堵养72 h的上清中,hIL-18蛋白含量达131.2 pg/ml,且RT-PCR结果显示细胞中hIL-18基因表达呈阳性.结论 成功构建hIL-18真核表达质粒pcDNA3.I/hIL-18,并建立U87/hIL-18单克隆细胞株,为IL-18基因修饰的胶质瘤疫苗研究打下了基础.
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