期刊简介

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  • 杂志名称:中国微侵袭神经外科杂志
  • 主管单位:广州军区联勤部卫生部
  • 主办单位:广州军区广州总医院
  • 国际刊号:1009-122X
  • 国内刊号:44-1459/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国微侵袭神经外科杂志2011年第08期

NEDD4-1shRNA对U251胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

李季林;于如同;盛罗平;陆林其;陈仁辉;陈雪林;陈华;顾泉;石琼

关键词:神经胶质瘤, 蛋白, NEDD4-1, 细胞增殖, 细胞凋亡
摘要:目的 探讨NEDD4-1 shRNA对U251胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法 构建NEDIM-1 shRNA表达载体.以不同比例质粒和脂质体转染U251细胞,通过荧光显微镜观察细胞存活情况,优化转染效率.转染48 h后采用Western blot、RT-PCR分别检测NEDD4-1蛋白及mRNA的表达,流式细胞术检测细胞周期,MTT法检测细胞增殖,DAPI荧光染色检测细胞凋亡.结果 NEDD4-1 shRNA表达载体构建成功.脂质体与质粒的佳转染效率比例为2.5 μl:1 μg,48 h转染效率在60%~700.与对照组比较,转染NEDD4-1 shRNA后,U251胶质瘤细胞NEDD4-1的蛋白及mRNA表达水平均下降(均P<0.05),细胞大多停滞在G<,0>-G<,1>期(均P<0.05),增殖率明显降低(均P<0.05),凋亡率显著增加(均P<0.05).结论 NEDD4-1作为PTEN泛素连接酶,为胶质瘤基因治疗提供靶点.